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产品名称 | Cu2+-ATPase |
检测方法 | 详见说明 |
规格 | 详见说明 |
货号 | BK-S65259 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-姜酚(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品6-gingerol
人胃腺癌细胞;BGC-8238-姜酚(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品8-Gingerol
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 姜酮(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Zingerone
CM-H130人视网膜微血管内皮细胞*培养基100mL姜酮(标准品)质量规格:GC≥98%,进口分装Zingerone
MKN-28细胞,人胃癌细胞 人骨肉瘤细胞,U-2 OS细胞 幼蚊细胞;C6/3610,12-二十九二炔酸(>97.0%(T))质量规格:>97.0%(T)10,12-Nonacosadiynoic Acid
RLFs, 大鼠肺成纤维细胞 RattusTWEEN80吐温80蛋白组学级4L9005-65-6RT
FETUB Others Mouse 小鼠 FETUB / Fetuin-B 人细胞裂解液 (阳性对照) 双(三基硅基)炔 Bis(trimqthylsilyl)ccqtylqnq 14630-40-1
SV40T转化人脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T12-metxylindole2-吲哚100克BR,48-50℃
EPHA4 Others Human 人 EphA4 / HEK8 (aa 570-986) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) DMSO-DImetxYLSULFOXIDE二亚砜(超)5x10ML67-68-5RT
CL-0380MDA-MB-157(人癌细胞)5×106cells/瓶×2(聚乙二醇4000)
EPD1 Others Mouse 小鼠 CD39 / EPD1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 顺式白藜芦醇cis-Resveratrol质量规格:美国进口
CL-0089H9c2(2-1) (大鼠心肌细胞)5×106cells/瓶×2反式白藜芦醇-4'-硫酸盐trans Resveratrol-4'-sulfate质量规格:美国进口
MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞 非雄激素依赖型前列腺癌,Tsu-Pr1细胞 ZR-75-1(癌细胞)顺式白藜芦醇4'-O-β-D-葡萄糖苷酸cis Resveratrol 4'-O-β-D-Glucuronide质量规格:美国进口
小鼠骨髓细胞;FDC-P1顺式白藜芦醇3-O-β-D-葡萄糖苷酸cis Resveratrol 3-O-β-D-Glucuronide质量规格:美国进口
SERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人细胞裂解液 (阳性对照) 反式白藜芦醇-3,5-硫酸氢盐trans Resveratrol-3,5-disulfate质量规格:美国进口
Cu2+-ATPaseFETUB Others Mouse 小鼠 FETUB / Fetuin-B 人细胞裂解液 (阳性对照) 染料木素/金雀异黄酮质量规格:≥98%,BRGenistein
SV40T转化人脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1染料木素/金雀异黄酮(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Genistein
EPHA4 Others Human 人 EphA4 / HEK8 (aa 570-986) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 三特丁基膦(1.0 M in )质量规格:1.0 M in Tri-tert-butylphosphine
CL-0380MDA-MB-157(人癌细胞)5×106cells/瓶×2吡螨胺(标准品)质量规格:分析标准品Tebufenpyrad
NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系 人肾癌Wilms,G-401细胞 NCI-H1869 [H1869](人肺癌细胞)萘乙酰胺(标准品)质量规格:分析标准品1-Naphthaleneacetamide
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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