一氧化氮NO含量测定试剂盒

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
中国仓鼠肺细胞;CHL[Phe2,Orn8]-催产素质量规格：>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin

BxPC-3细胞，人原位胰腺腺癌细胞 人皮肤纤维微细胞系,Malmc细胞 小鼠浆细胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催产素质量规格：>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin

HT-1080(人纤维肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲状旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)质量规格：>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)

Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g[Trp4]-Kemptide质量规格：>95%,BR[Trp4]-Kemptide

人髓核细胞裂解物HNPCL（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Coumarin
人胚肺成纤维细胞;MRC-5氧化型辅酶Ⅱshēng huà shì jì容量：RT25克

HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-溴尿嘧啶 5-BroMourccil;5-BroMo-2,4,3H)-pyriMidinqdionq; 21-0-7

NSC，大鼠神经干细胞溴紫葡萄糖肉汤shēng huà shì jì容量：25克

CD38 Others Human 人 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 抗生素Ⅱ号培养基(Ph6.5～6.6)shēng huà shì jì容量：RT25克

大鼠视网膜微血管内皮细胞*培养基 100mLRhamnose 5g/10g/100g 国产
EPHA3 Others Human 人 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛伐他汀二聚体杂质Simvastatin Dimer Impurity质量规格：美国进口

脐静脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)辛伐他汀，1-芘乙酰酯Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester质量规格：美国进口

JK(Jurkat)细胞，人细胞瘤细胞 615小鼠网织细胞性白血病瘤株,L615细胞 人结肠平滑肌细胞裂解物HCSMCL2,3-脱氢辛伐他汀酸钠盐2,3-Dehydro Simvastatin Acid  Salt质量规格：美国进口

NCI-H2227(人小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2脱氢辛伐他汀Dehydro Simvastatin质量规格：美国进口

Calu-3(人肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0062CHO-K1(仓鼠卵巢细胞亚株)5×106cells/瓶×2 正常小鼠Leydig细胞;TM36'-羧基辛伐他汀6'-Carboxy Simvastatin质量规格：美国进口
一氧化氮NO含量测定试剂盒HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 水溶毛地黄皂苷质量规格：进分,BRDigitonin-water-soluble

NSC，大鼠神经干细胞DSP质量规格：BRDSP

CD38 Others Human 人 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 羟丙基β环糊精;2-羟丙基-β-环糊精质量规格：>98%,药用级HPCD

大鼠视网膜微血管内皮细胞*培养基 100mL羧壳聚糖质量规格：羧基化度80%,粘度10mPa.s~80mpa.s(cps);氧羧Carboxymethyl chitosan

SNU-739人肝癌细胞 SNU-739 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS依诺肝素钠质量规格：BR，细胞培养级；Anti-factor Xa activity(dried substance)：90.0~125.0IU/mg；Anti-factor Ⅱa activity(dried substance) ：20.0~35.0IU/mg。符合USP35标准Enoxaparin
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。