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商品介绍:
测定意义: 甲醛是一种能与蛋白质、核酸和脂类产生非特异性反应的活泼化合物,对所有生物都具有很高毒性。甲醛脱氢酶作为含锌中等链醇脱氢酶(ADH)的家庭成员之一,广泛存在于原核和真核生物中,该酶能利用NAD+作为辅酶,将有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途径中的关键酶。 测定原理 甲醛脱氢酶催化甲醛和NAD+产生NADH,在340nm处的吸光值会增加,测定340nm处的吸光值变化,可计算得到甲醛脱氢酶的活性。 自备实验用品及仪器 天平、离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。 |
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,239843个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
甲醛脱氢酶(FDH)测试盒微量法 | 100管/96样 | 微量法 | BK-01S6345 |
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约9843个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
3%氯化钠碱性蛋白胨水 3%Sodium Chloride Peptone Water 9ml*20支/包
50mg D- 氨基酸氧化 D-Amino Acid Oxidase 4℃保存
250mL RNase-Free SSPE(无RNase的SSPE),20X,pH7.4 RNase-Free SSPE,20X,pH7.4 常温保存
1 管 JM1肠杆菌 JM110 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pRNA-H1.1/Adeno pRNA-H1.1/Adeno 低温运输,-20℃保存
100mL 动物RNAout (TRIzol) Animal RNAOUT(TRIzol) 4℃保存
2 ug pcDNA3.1/Zeo(+) pcDNA3.1/Zeo(+) 低温运输,-20℃保存
100次 动物种属鉴定PCR Mix 2(16S rDNA) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
5g 甲基橙 Methyl Orange 室温干燥保存
50T 牛海绵状脑病毒PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
12x50nm Cyanine 3-NHS Ester Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
甲醛脱氢酶(FDH)测试盒微量法EBNA1/EBV Nuclear Antigen EB毒核抗原1抗体 规格: 0.2ml
TPD54/TPD52L2 瘤蛋白D54蛋白抗体 规格: 0.2ml
PDGF AB+BB 小板源性生因子AB+BB抗体 规格: 0.2ml
TRIM17/RNF16 环指蛋白16抗体 规格: 0.2mlGlutaminase 谷抗体 0.2ml
PTEN/MMAC1(NT) 一种瘤抑制基因抗体(N端) 规格: 0.1mlTubulin-beta 微管蛋白抗体(免疫组化用抗体)Tubulinβ 规格: 0.1ml
M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激-M2 规格: 0.1mlCDX2/3 尾侧型同源转录因子2/3抗体 规格: 0.2ml
KLHL22 Kelch样蛋白22抗体 规格: 0.2mlKLK2 激肽释放2抗体 规格: 0.1ml
phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39) 磷酸化转录因子3抗体 0.1mlCXCL16 CXC趋化因子16抗体 规格: 0.1ml
Cecropin monoclonal 杀菌肽/天蚕抗菌肽单克隆抗体 规格: 1mlABH8/ALKBH8 AlkB同源蛋白8抗体 规格: 0.2ml
LIPK 脂肪家庭成员K抗体 规格: 0.2mlPerilipin A 脂滴包被蛋白Perilipin-A抗体 规格: 0.1ml
TLR11 Toll样受体11抗体 规格: 0.2mlPhospho-GRB10 (Tyr67) 磷酸化生因子受体结合蛋白10抗体 规格: 0.1ml
Sigma1R 衰老相关基因8蛋白抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-human IgG/Gold 胶体金标记的驴抗人IgG 规格: 0.5ml
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