脑脊液蛋白测定试剂盒

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
HCT-8(人盲肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴肾细胞;MMK3录化1公斤

人导管瘤细胞;BT-474姆沙伯W/AW-DMCS CHROMOSORB W/cW-DMCS

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 邻苯 o-Phenylenediamine (≥98%, OPD)  10G 通用试剂

CM-R022大鼠甲状腺上皮细胞*培养基100mL录化三本四氮唑沙保罗培养基25毫升2～8℃

Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 牛肾细胞,MDBK细胞 Hs 578Bst(人成纤维细胞)(D-基半乳糖)
TWSG1 Others Mouse 小鼠 TWSG1 人细胞裂解液 (阳性对照) MEGA-10MEGA-105G85261-20-7COLD

大鼠脑膜细胞*培养基 100mL2-安基-4-羧醋 2-cminoisonicotinic ccid 1336-8-

MCF 10A人正常上皮细胞 MCF 10A of normal human mammary epithelial cells MEGM Bullet Kit(Clonetics Corparation CC-3150)+100ng/ml choleratoxin(Sigma C8052)2XYTMEDIUMBROTH2XYT 培养基肉汤生物技术级100GRT

IFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 标签)苄青霉素钠1公斤

MPC-11(小鼠浆细胞瘤) 5×106cells/瓶×2 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纤维细胞)2183-17-71-1酸钠盐ALPHA-NAPHTHYL PHOSPHATE DIwo7ium SALT
SW579(人甲状腺鳞癌细胞 ) 5×106cells/瓶×2辛弗林Synephrine质量规格：>98%,BR

HSaVEC-c 人隐静脉内皮细胞(HSaVEC) 500,000cells 成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)辛弗林盐酸盐Synephrine HCl质量规格：HPLC≥98%，标准品

肾小管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)三尖杉宁碱(标准品）Cephalomannine质量规格：HPLC≥98%，标准品

GHR Others Rat 大鼠 GHR / Growth Hormone Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 吉莫斯特;吉美嘧啶(标准品)Gimeracil质量规格：>99%,标准品

NRL1 化大家鼠肺成纤维样细胞吉莫斯特;吉美嘧啶Gimeracil质量规格：>98%,二氢嘧啶脱氢酶(DPD)抑制剂
脑脊液蛋白测定试剂盒大鼠脑膜细胞*培养基 100mL丙草胺标准溶液(10μg/ml,u=2%)质量规格：10μg/ml,u=2%Pretilachlor solution

MCF 10A人正常上皮细胞 MCF 10A of normal human mammary epithelial cells MEGM Bullet Kit(Clonetics Corparation CC-3150)+100ng/ml choleratoxin(Sigma C8052)残杀威标准溶液(10μg/ml,u=4%)质量规格：10μg/ml,u=4%Propoxur solution

IFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 标签)氟比洛芬(国产)质量规格：>98%,国产美仑Flurbiprofen

MPC-11(小鼠浆细胞瘤) 5×106cells/瓶×2 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纤维细胞)氟比洛芬(进口)质量规格：>98%,Flurbiprofen

Hep-2, 人喉癌细胞系氟比洛芬（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Flurbiprofen
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。