一氧化氮NO含量测定试剂盒一步法

仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
实验通用规则：

ECE2 Others Human 人 ECE-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-溴芴(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2-Bromofluorene

人正常前列腺上皮细胞;RWPE-12-溴-9-芴酮(>96.0%(GC))质量规格：>96.0%(GC)2-Bromo-9-fluorenone

人肺动脉内皮细胞(HPAEC) ( 5×105 )2-溴-9,9-二芴(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2-Bromo-9,9-dimethylfluorene

CL-0333E.G7-OVA(小鼠T瘤细胞)5×106cells/瓶×22,7-二氨基芴(>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)2,7-Diaminofluorene

人导管癌细胞;HCC38 大鼠关节软骨细胞*培养基 100mL9-溴-10-苯基蒽(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)9-Bromo-10-phenylanthracene
DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞 DLD-1 human colorectal cancer cell line 1640+10% FBSCOLUMNREGENERATIONKIT柱再生试剂01kitRT

CD40LG Protein Mouse 重组小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)醋-2-丁氧基酯 2-Butoxyqthyl ccqtctq 11-07-

人脂肪间充质干细胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105) EC109，人食管癌细胞 HumanL-脯酸盐酸盐5克RT，避光

EB病毒转化的人B细胞;KMY0901透析袋27DM,34MDLC200u保存：-20℃

人齿龈成纤维细胞 (HGF)( 5×105 ).3-二录-5.6-二清对本醌2,3-Dichloro-5,6-7iyeno-1,4-benzoinoneone
山羊皮肤细胞;WGS1齐墩果酸Oleanolic acid质量规格：HPLC≥95%，BR

CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 齐墩果酸(高98%）Oleanolic acid质量规格：HPLC≥98%，BR

CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纤维5×106cells/瓶×2齐墩果酸(标准品）Oleanolic acid质量规格：HPLC≥98%,标准品

HGC-27人胃癌细胞 细胞，HelaS3细胞 ES-2(卵巢透明细胞癌细胞)莽草酸Shikimic acid质量规格：≥98%,BR

人小细胞肺癌;NCI-H2227莽草酸(标准品)Shikimic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品
一氧化氮NO含量测定试剂盒一步法CD40LG Protein Mouse 重组小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)硫酸庆大霉素(标准品)质量规格：含量测定Gentamicin sulfate

人脂肪间充质干细胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105) EC109，人食管癌细胞 Human头孢呋辛钠质量规格：>855ug/MG,USP30Cefuroxime 

EB病毒转化的人B细胞;KMY0901瑞舒伐他汀/罗苏伐他汀游离酸质量规格：>97%,游离酸Rosuvastatin

人齿龈成纤维细胞 (HGF)( 5×105 )苏丹I/溶剂黄14质量规格：BS生物染色级Sudan I/Solvent Yellow 14

CL-0399NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞)5×106cells/瓶×2苏丹II/苏丹2/溶剂橙7质量规格：BSSudan II /Solvent Orange 7

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