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产品名称 | 丙酮酸Pyruvate含量测定试剂盒 |
检测方法 | 详见说明 |
规格 | 详见说明 |
货号 | BK-S65415 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
THOP1 Others Mouse 小鼠 THOP1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 琼脂粉25克RT,避光
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-11-基苯并三唑 1-Aminobenzotriazole 1614-12-6 100MG 通用试剂
MGC80-3细胞,胃癌细胞 人喉癌细胞,TU212细胞 正常大鼠肾细胞;NRK吲哚-3-全酰录 INDOLq-3-GLYOXYLYL CHLORIDq 980-09-
杂交瘤(B类);Z153A2A5B3A12-N,N-双(2-乙磺酸)shēng huà shì jì容量:1克
RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人细胞裂解液 (阳性对照) 邻本基酚2-pxenylpxenol
IL12A & IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白脆壁质酶,英文名或英文缩写:Lysozyme(Chinken egg),级别:USP级,1:30000,规格:500克
UACC-812(人导管瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 EB-3 [EB3](人样Butt瘤细胞) Testosterone,≥99.0% 1G 通用试剂
CM-R113大鼠嗅鞘细胞*培养基100mL拂替卡炳醋酯 Fluticcsonq propionctq(100Mg) 80474-14-
BMPR1B Others Human 人 BMPR1B / ALK-6 人细胞裂解液 (阳性对照) D-山梨糖醇,英文名或英文缩写:D-Sorbitol,级别:高,98%,规格:10毫克
内皮细胞培养基ECM硅酮 OV-17SILANIZATION SOLUTION VI
人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 )尿胰蛋白酶抑制剂Urinary trypsin inhibitor fragment质量规格:>95% (HPLC),BC
CL-0325C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纤维细胞)5×106cells/瓶×2氧化锌(>98%,BC)Zinc oxide质量规格:>98%,BC
人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;M619 大鼠胎儿成纤维细胞*培养基 100mL4(5)-咪唑(>98%,BR)4(5)-Methylimidazole质量规格:>98%,BR
H-4-II-E 大鼠肝细胞瘤细胞氢氧化铝(>98%,BR)Aluminum hydroxide质量规格:>98%,BR
ECE2 Others Human 人 ECE-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸铵三水(>98%,BR)Ammonium phosphate, tribasic , trihydrate质量规格:>98%,BR
丙酮酸Pyruvate含量测定试剂盒UACC-812(人导管瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 EB-3 [EB3](人样Butt瘤细胞)枸橼酸喷托维林/托可拉斯/妥克拉司质量规格:含量98.0%~100.5%Carbetapentane /Pentoxyverine
CM-R113大鼠嗅鞘细胞*培养基100mL卡洛芬质量规格:>99%Carprofen
BMPR1B Others Human 人 BMPR1B / ALK-6 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸妥布霉素质量规格:含量634μg/mg-739μg/mg,BRTobramycin Sulfate
内皮细胞培养基ECM硫酸妥布霉素(标准品)质量规格:效价测定Tobramycin Sulfate
PC-3M 2B4细胞,人前列腺癌细胞高转移亚系 小鼠原B细胞株,BaF3细胞 人肠平滑肌细胞HISMC托萘酯质量规格:>98%,USP30,BRTolnaftate
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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