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乳酸脱氢酶(LDH)测试盒可见分光光度法

简要描述:乳酸脱氢酶(LDH)测试盒可见分光光度法辅酶Ⅰ系列公司正在出售的产品:麦康凯肉汤USP颗粒 英文名称:MacConkey Broth Medium 产品规格:250g 玫瑰红钠琼脂培养基颗粒 英文名称:Rose Bengal Agar Medium 产品规格:300ml/袋*10 10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基颗粒 英文名称:10% Trypticase Soy Broth 产品规格:225ml

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-29
  • 访  问  量:453

详细介绍

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:乳酸脱氢酶(LDH)测试盒可见分光光度法

产品规格:50管/24样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6326

产品分类:辅酶Ⅰ系列
商品介绍:

测定意义

测定意义:

LDHEC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。

测定原理:

LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

10次 百万碱基级植物DNAout   常温

2 ug P36-Luc P36-Luc 低温运输,-20℃保存

TPY肉汤 TPY Broth 250g

100mL 吐温 -20 Tween-20 室温密封保存

D-发酵管(枯草芽孢杆菌)  20支

100 T ROS活性氧检测试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

25mL LDS-Sample Buffer (non-reducing,4X)  LDS-Sample Buffer (non-reducing,4X)  常温保存

30次 单孢子全基因组扩增试剂盒 Single Spore WGA Kit -20℃保存

2 ug pLVX-AcGFP1-N1 pLVX-AcGFP1-N1 低温运输,-20℃保存

淀粉水解培养基 The Hydrolysis of Starch Medium 250g

1瓶 OS-RC-2细胞株 OS-RC-2 低温运输和保存

乳酸脱氢酶(LDH)测试盒可见分光光度法Rabbit Anti-Bov IgG/Cy7  Cy7标记的兔抗牛IgG  规格: 0.1ml

SPATA12  睾特异表达新基因5抗体 规格: 0.1ml

CREG1  E1A激活基因刺激蛋白1抗体 规格: 0.2ml

ZNF420  锌指蛋白420抗体 规格: 0.2ml

Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的驴抗羊IgG 规格: 0.1ml

CDKN3  细胞周期蛋白依赖性激抑制蛋白3抗体 规格: 0.2ml

FAM83F  FAM83F蛋白抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgG  小鼠抗人IgG 规格: 1mg

ADAM23  去整合素样金属蛋白23抗体 规格: 0.2ml

Rabbit anti-MG IgG/RBITC  罗丹明标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.3ml

phospho-LLGL1 + LLGL2(Ser650+Ser654)  磷酸化相似瘤抑制基因HUGL抗体 规格: 0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1016)  磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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