细胞活性鉴别染液

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
小鼠胚胎成纤维细胞;PA3174,4'-二甲氧基二苯酮(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC)4,4'-Dimethoxybenzophenone

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D3 IV型胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL2,2'-二羟基二苯甲酮(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC)2,2'-Dihydroxybenzophenone

HGC-27人胃癌细胞 Human4,4'-二氨基二苯甲酮(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)4,4'-Diaminobenzophenone

CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,4'-二二苯甲酮(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC)4,4'-Dichlorobenzophenone

人小梁网细胞RNAHTMC miRNA5 μg2,2',4,4'-四羟基二苯甲酮(>95.0%(T))质量规格：>95.0%(T)2,2',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone
CM-R028大鼠食管平滑肌细胞*培养基100mL乙酸纤维素薄膜shēng huà shì jì容量：1 O.D.

FAM3B Others Human 人 FAM3B 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-溴-1-乙基四... 2-Bromo-1-ethyl-pyridinium tetrafluoro... 878-23-9 5G 通用试剂

小鼠成年表皮角质形成层细胞*培养基 100mL乳醋 Lcctic ccid (cS) 1920/1/2

YAC-1小鼠瘤细胞 YAC-1 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS黄芩甙，英文名或英文缩写：Baicalin，级别：色固，规格：25克

IL17RD Protein Canine 重组狗 IL17RD 蛋白 (His 标签)1142-20-7N-苄氧羰基-L-酸N-Carbobenzyloxy-L-alanine
SHZ-88细胞，癌细胞 人肥大细胞白血病细胞,CHMAS细胞 EB病毒转化的人B细胞;KMY1036美罗培南钠盐Meropenem  Salt质量规格：美国进口

22RV1(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×26,8-二甲氧基莫西沙星盐酸盐6,8-Dimethoxy Moxifloxacin 质量规格：美国进口

PVR Others Mouse 小鼠 CD155 / PVR 人细胞裂解液 (阳性对照) 8-乙氧基莫西沙星8-Ethoxy Moxifloxacin质量规格：美国进口

人羊膜上皮细胞裂解物HAmEpiCL8-去甲氧基-8-氟莫西沙星8-Desmethoxy-8-fluoro Moxifloxacin质量规格：美国进口

OMG Others Mouse 小鼠 OMG / OMGP (aa 1-245) 人细胞裂解液 (阳性对照) 外消旋顺式-莫西沙星酰基-β-D-葡萄糖苷酸rac cis-Moxifloxacin Acyl-β-D-glucuronide质量规格：美国进口
细胞活性鉴别染液SkMC Pellet 人骨骼肌细胞团块 > 1 mio.cells 人生发基质细胞cDNAHHGMC cDNAN-苄基甘酸乙酯，英文名或英文缩写：N-Benzylglycine etxyl ester，级别：BR，97%，规格：25克

CL-0090Hacat(人永生化角质形成细胞)5×106cells/瓶×2胆碱氧化酶 Choline oxidase (≥10 units/mg) 9028-67-5 50UN 通用试剂

MBL2 Others Human 人 MBL2 / MBL / COLEC1 CHO细胞裂解液 (阳性对照) N-alpha-芴氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色安醋 Fmoc-Trp(Boc)-OH 14384-78-6

人神经细胞裂解物HNLL-pxenYLALANINEL-本美国药典级5kg

牛肾细胞;MDBK 人咽鳞癌细胞，FaDu细胞 Nb2-11细胞，小鼠瘤细胞硅酮　OV-7Silicone OV-7
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。