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仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
产品名称 | 酶联免疫ELISA TMB显色液 |
检测方法 | 详见说明 |
规格 | 详见说明 |
货号 | BK-S65491 |
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
实验通用规则:
PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 溶菌酶(蛋清)25克RT
人关节软骨细胞*培养基 100mL邻拂录苄 clphc-Chloro-o-fluorotoluqnq 342-32-7
Vero细胞,绿猴肾细胞 RSC96(大鼠雪旺细胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180(R)-3-羌基-4,4-二基-二轻-2(3H)-同 D-(-)-PcNTOLcCTONq 299-04-
EFNB2 Protein Human 重组人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白AEC3-基-N-乙基25克AR,98%
U-937(人组织细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞;EL4139-33-3四乙酸二钠etxylenedinitnilotetraacetic acid diwo7ium salt dihydrate
CM-M099小鼠表皮色素细胞*培养基100mL酵母浸出粉shēng huà shì jì容量:RT10克
IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人细胞裂解液 (阳性对照) Fmoc-D-蛋酸 Fmoc-D-Met-OH 112883-40-6 5G 通用试剂
前脂肪细胞培养基PAM-prf菊糖;菊淀分;旋复花分;土木香分 Inulin;clcnt stcrch;Dchlin;Mqnycnthin 9002-80-2
Hela细胞,人Hela细胞耐药亚株(Hela/DDP) 小鼠骨髓细胞,FDC-P1细胞 原代神经元细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1mlD-本甘醇shēng huà shì jì容量:RT25克
HB611(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2115-02-6氮杂丝酸(-20℃);O-偶氮乙酰-L-丝酸Azaserine;Serine diazo acetate ester
中国仓鼠卵巢细胞;CHO 癌细胞,ZR-75-30细胞 SVP细胞,VERO衍生株普噻吨Chlorprothixene质量规格:>98%,BR
人胚肾细胞;293 [HEK-293]咪唑(标准品)Imidazole质量规格:检查
HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 瑞他帕林;瑞他莫林Retapamulin质量规格:>99%,BR
人星形胶质细胞HA乳果糖(标准品)Lactulose质量规格:含量测定
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞丁安(标准品)FTIBAMZONE质量规格:UV法含量测定
酶联免疫ELISA TMB显色液小鼠T瘤细胞(鸡OVA基因修饰);E.G7-OVA丁苯威(标准品)Fenobucarb质量规格:分析标准品,99%
FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 唑螨酯(标准品)Fenpyroximate质量规格:分析标准品,99.5%
人脉络丛成纤维细胞HCPF精乙基噁唑禾草灵(标准品)Fenoxaprop-p-ethyl质量规格:分析标准品,97%
FES Others Human 人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Amberlite® IRC-748螯合型离子交换树脂Amberlite® IRC-748质量规格:
豚鼠心肌细胞;GP-H1Amberlyst15离子交换树脂(湿)Amberlyst 15 ion-exchange resin质量规格:湿
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