探针标记专用PCR Mix

注意事项：产品仅用于科研1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
产品名称：探针标记专用PCR Mix 
规格： 详见说明
货号：BK-P96831
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

特点优势：
   1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
   2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
   3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
   4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
   6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

荧光定量PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
2-双环已基膦-2 ,6-二异炳氧基联本 95% 2-DICYCLOHqXYLPHOSPHINO-2',6'-DI-I-PROPOXY-1,1'-BIPHqNYL 787618--8  英文名称MousesP-selectinELISAKit小鼠可溶性sP-选择素(sP-selectin)规格：96T/48T
胰岛素(牛)INSULIN质量规格：BR，27U/mg,进分  人结蛋白(DES)抗体试剂盒 Human ai-desmin (DES) aibody ELISA kit  人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

三丁基化锍(>96.0%(T))Tributylsulfonium Iodide质量规格：>96.0%(T)  Ratai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAbELISAKit大鼠抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAGAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T  猪P450胆侧链裂解酶(P450scc)试剂盒 Pig Cytochrome P450 Side Chain Cleavage Enzyme,P450scc ELISA kit

螺[1,3,3-基吲哚并二氢吡喃][光致变色化合物](>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinobenzopyrylospiran [Photochromic Compound]质量规格：>98.0%(HPLC)(T)  组蛋白H3-K27(mono/di/i)甲基化检测试剂盒10/20等  病毒H9亚型(AIV-H9)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T

1,3,3-基吲哚-奈谔嗪(>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinonaphthospirooxazine [Photochromic Compound]质量规格：>98.0%(HPLC)(T)  Mouseai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISA试剂盒小鼠抗心1脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T  humanParathyroidhormone,PTHELISA试剂盒人甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
BSudan Red B/Solvent Red 25质量规格：AR  小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒 ，英文名： HIS ELISA Kit  组织样品组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)活性比色法定量检测试剂盒20

7B/溶剂红19/脂肪红7BSudan Red 7B/Solvent Red 19质量规格：BS  小鼠凝血因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA检测试剂盒MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 96T/48T  Humangrowth-associatedprotein43,GAP-43ELISAKit人生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒规格：96T/48T

优级真空泵油(Viscosity Grade 100)Vacuum pump oil质量规格：Viscosity Grade 100  人抗白蛋白抗体(AAA)试剂盒 Human ai-albumin aibody,AAA ELISA Kit  人胸腺表达趋化因子(TECK/CCL25)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

优级真空泵油(Viscosity Grade 150)Vacuum pump oil质量规格：Viscosity Grade 150  RabbitoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit兔肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T  猪凝血因子X(F10)试剂盒 Pig coagulation factor X,F10 ELISA kit
探针标记专用PCR Mix大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106D-AlanineD-2-基5克BR，99%

CDH4 Others Human 人 R-Cadherin / CDH4 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-硼醋 2-Thiophqnqboronic ccid 6162-68-0

人扁桃体上皮细胞HTEpiCCobalt(II,III)oxide氧化钴100克CP

HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆