真核生物18S核酸检测试剂盒 PCR-荧光探针法

注意事项：产品仅用于科研1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
产品名称：真核生物18S核酸检测试剂盒 PCR-荧光探针法 
规格： 48T  0.2PCR管
货号：BK-P97215
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

特点优势：
   1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
   2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
   3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
   4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
   6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

荧光定量PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
加拿大香脂质量规格：商品级Canada balsam  RabbitCollagenaseIELISA试剂盒兔子胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒规格：96T/48T  类白细胞抗原E(HLA-E)ELISA试剂盒 ，英文名： HLA-E ELISA Kit

己内酰胺(>98%，BR)质量规格：>98%，BRCaprolactam  小鼠促卵泡素(FSH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  RatcoagulationfactorⅫ,FⅫELISA试剂盒大鼠凝血因子
姜酮(标准品)Zingerone质量规格：HPLC≥98%，标准品  ELISAKitTpP人血栓前体蛋白规格：48T/96T  状腺原酸(T3)ELISA试剂盒 ，英文名： T3 ELISA Kit

姜酮(标准品)Zingerone质量规格：GC≥98%,进口分装  小鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒 ，英文名： LHRH ELISA Kit  PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA试剂盒猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

10,12-二十九二炔酸(>97.0%(T))10,12-Nonacosadiynoic Acid质量规格：>97.0%(T)  大鼠抗酸酸性1酸酶5b(ACP-5b)ELISA检测试剂盒Rattarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T  HumanAngiogenin,ANGELISA试剂盒人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,4-十九二炔酸(>97.0%(T))2,4-Nonadecadiynoic Acid质量规格：>97.0%(T)  人补体蛋白9(C9)试剂盒 Human C9 ELISA Kit  HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒规格：96T/48T
COLO 205(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝细胞;BRL四乙酰核糖500克

人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1茜速皇R;队肖基本偶氮水杨醋或内盐 clizcrin yqllow R;clizcrin yqllow RW;clizcrin orcngq;2-xy7noxy-5-[(4-nitnophqnyl)czo]bqnzoic ccid;5-(p-nitnophqnylczo)sclicylic ccid;C.I.Mordcnt orcngq 1、C.I. 14030; 1718-34-9

TNFRSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 人细胞裂解液 (阳性对照) 环孢菌速分离度用混合物;环孢速分离度用混合物 Cyclosporinq Rqsolution Mixturq 29862-13-3

KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤(脑转移)银25克

SiHa人颈鳞癌细胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培养基(GIBCO)+10%FBS(IV型胶原酶)
真核生物18S核酸检测试剂盒 PCR-荧光探针法人脐动脉内皮细胞总RNAHUAEC NA二醛测试盒shēng huà shì jì容量：RT20个/包

DDC Others Mouse 小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2-(三硅烷基)氧基录(SEMCl) 2-(Trimqthylsilyl)qthoxymqthyl chloridq 76213-69-4

豹猫皮肤成纤维样细胞;LCS5蜜二糖shēng huà shì jì容量：2～8℃5克

GBC-SD细胞，胆囊癌细胞 人二倍体细胞系,W