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注意事项:产品仅用于科研1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称:猪瘟病毒疫苗株染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
规格: 50次
货号:BK-P97058
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
荧光定量PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
血红素,高铁血红素;羟基血红素 Hematin 分子式: C34H33FeN4O5 分子量:633.50
蕈青霉素;Paxilline Paxilline*, from Penicillium paxilli 分子式:C27H33NO4 分子量:435.56
亚甲紫3RAX(>90%,BS) Methylene violet 3RAX 分子式:C22H23ClN4 分子量:378.90
亚精胺0酸盐 Spermidine phosphate salt hexahydrat
酵母浸粉;酵母粉 Yeast extract 物理性状及指标: 色泽:……………………浅棕色
马铃薯葡萄糖水 Potato Dextrose Water 用法:称取本品 26.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15分钟,备用。 用途及描述:科研试剂,用于椰毒假单胞酵米面亚种和真菌的增菌培养。
麦芽浸膏 Malt Extract 用途及描述:科研试剂,微生物培养基 储存条件:18~25°C,避光防潮密闭干燥。
明胶 Gelatin 分子式: 分子量: 物理性状及指标:
脑心浸出液肉汤(BHI)颗粒 BHI Broth 产品介绍 用途:营养丰富,用于培养各种细菌。
脂酶,英文名或英文缩写:Lipase(pocine pancreas),级别:生物技术级,0.5u/mg,规格:5克 人胸苷酸合成酶(TS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
554-12-1metxyl propionate; 猪凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒 Pig coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
L-Lactide乳酸1克CP,70% HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-RELISAKit 人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
顺二酰 3,6-Dixy7noxypyridczinq 13-33-1 Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISA试剂盒人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
L--GlucoseL-(-)-无水葡萄糖2×0.25毫升BR,95% 组织(NO)活性比色法定量检测试剂盒50次
猪瘟病毒疫苗株染料法荧光定量RT-PCR试剂盒一氧化硅shēng huà shì jì容量:25克 组织苹果酸脱氢酶(MDH)活性比色法定量检测试剂盒20次
2687-91-4N-乙基-4-1完酮 (NEP)N-etxyl-2-pyrrolidone HumanImmuneRNA,IrnaELISAKit人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOLD-N-GELRNADYE,200X12.5mlRT 人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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