须毛癣菌LAMP试剂盒实验要点

实验要点：

1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。

2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。

3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用ben酚和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（ben酚—氯仿—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。

操作流程：

1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。

2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；

3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即*浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。

4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait*渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 标签)

重组人 CCL21 / 6Ckine 蛋白

重组人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重组小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重组食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 标签)

重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 标签)

重组食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 标签)

重组小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 标签)

重组小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 标签)

重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 标签)

重组小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 标签)

重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 标签)

重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 标签)

重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签)

重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签)

重组小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签)

重组人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 标签)

重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)

重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 标签)

重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77)

重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 标签)

重组人 CXCL4 / PF4 蛋白

重组人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 标签)