操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
麦芽浸膏汤规格: 250g作用: 用于酵母和霉菌的培养,还用于酸性罐头食品商业无菌检验(GB/T4789.26-2003)。
麦芽汁培养基规格: 250g作用: 用于酵母菌的增菌培养
麦芽汁琼脂培养基规格: 250g作用: 供酵母菌的培养、鉴定及保存菌种用。
1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基规格: 100g作用: 用于白色念珠菌芽管试验的培养
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)规格: 250g作用: 用于酵母菌的培养,及供药品和生物制品中含王浆和蜂蜜的合剂酵母菌数测定用。
沙氏葡萄糖琼脂培养基规格: 250g作用: 用于白色念珠菌的培养。
沙氏葡萄糖肉汤培养基规格: 250g作用: 沙氏葡萄糖液体培养基用于白色念珠菌的培养。
沙氏液体培养基规格: 250g作用: 用于真菌的增菌培养,还用于一次性使用卫生用品真菌定性检测
沙氏琼脂培养基规格: 250g作用: 用于真菌的分离培养,还用于一次性使用卫生用品真菌菌落总数检测
霉菌液体培养基规格: 250g作用: 用于霉菌、酵母的增菌和培养
马铃薯琼脂规格: 100g作用: 用于霉菌的培养
马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)规格: 250g作用: 供霉菌和酵母菌计数及分离培养
改良马丁琼脂培养基(真菌营养琼脂培养基)规格: 250g作用: 用于真菌培养及药品和生物制品无菌检查用
改良马丁培养基 (真菌培养基)规格: 250g作用: 用于真菌培养及药品和生物制品无菌检查用。
高盐察氏培养基规格: 250g作用: 用于饲料中霉菌的检验的分离培养和形态鉴别
玫瑰红钠琼脂培养基规格: 250g作用: 供药品和生物制品中霉菌和酵母菌的计数、分离和培养用。
孟加拉红培养基(虎红琼脂)规格: 250g作用: 供霉菌和酵母的计数、分离和培养用
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