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产品名称 | Mg2+-EGTA-ATP酶测试盒 |
检测方法 | 比色法 |
规格 | 50管/25样 100管/50样 |
货号 | BK-S63921 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯佐卡因-d4Benzocaine-d4质量规格:美国进口
CM-H106人内脏脂肪细胞*培养基100mL盐酸苯达莫司汀-d5Bendamustine-d5 (major) 质量规格:美国进口
MGC803-GFP细胞,绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞 人成骨肉瘤细胞,Saos-2细胞 293来源病毒包装细胞;ΦA-GP苯达莫司汀Bis-mercapturic 酸Bendamustine Bis-mercapturic Acid质量规格:美国进口
Eca-109(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×217-Oxo倍他米17-Oxo Betamethasone质量规格:美国进口
C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 倍他米-d5Betamethasone-d5质量规格:美国进口
CL-0405NCI-H716(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2雷特格韦质量规格:>98.5%,BRRaltegravir
人羊膜间充质基质细胞 Sars蛋白表达株,293001A细胞 NCI-H596 [H596](人肺癌细胞)雷帕霉素/西罗莫司质量规格:>98.0%,BR,可用于细胞培养Rapamycin(Sirolimus)
人肺鳞癌细胞;NCI-H520氯硝柳胺质量规格:>99%,BRNiclosamide
HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯硝柳胺(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Niclosamide
EB病毒转化的人B细胞;KMY0911环丙沙星质量规格:>99%,USP32,BR,可用于细胞培养Ciprofloxacin
Acc-3细胞,涎腺腺样囊性癌细胞 人胃癌细胞,BSG823细胞 犬胸腺细胞;cf2Th苯噻啶Pizotifen质量规格:美国进口
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1D3普伐他汀Pravastatin质量规格:美国进口
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-α-羟基普伐他汀内酯3α-Hydroxy Pravastatin Lactone质量规格:美国进口
人骨骼肌细胞HSkMC3-α-羟基普伐他汀钠盐3α-Hydroxy Pravastatin Salt质量规格:美国进口
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) (S)-3’’-羟基普伐他汀钠盐(S)-3’’-Hydroxy Pravastatin Salt质量规格:美国进口
Mg2+-EGTA-ATP酶测试盒人肾上皮细胞*培养基 100mL佛司可林(标准品)Forskolin质量规格:HPLC≥98%,标准品
B16F10细胞,小鼠色素瘤高转移细胞 FRhK-4(恒河猴胚肾细胞) SV40转染人成骨细胞;hFOB 1.19黄藤素(标准品)Palmatine质量规格:HPLC≥98%,标准品
CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白盐酸西那卡塞;盐酸甲状旁腺激素Cinacalcet HCl,AMG073质量规格:>99%,BR
SHG-44 (人胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 黄藤素Palmatine质量规格:≥97%,BR
人胚肺成纤维细胞;MRC-5链霉蛋白酶/链丝菌蛋白酶/链霉菌蛋白酶Pronase E质量规格:BR,4000u/mg,进分
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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