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蔗糖酶测试盒微量法

简要描述:蔗糖酶测试盒微量法公司正在出售的产品:BM液体培养基 英文名称: 产品规格:250g BM固体培养基 英文名称: 产品规格:250g BF839菌计数选择培养基 英文名称:BF839 Bacterium Count Selective Medium 产品规格:250g BYP琼脂培养基 英文名称: 产品规格:250g

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-26
  • 访  问  量:643

详细介绍

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,46个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

蔗糖酶测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6701

商品介绍:

测定意义:

蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的关键酶之一,能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。

测定原理

本试剂盒采用3.5-二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5-二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。

所需的仪器和用品

可见分光光度计、沸水浴、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约51个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

25mL Bovine Serum Albumin Solution(BSA溶液),1mg/mL Bovine Serum Albumin Solution,1mg/mL 常温保存

100次 柱式DNA胶回收试剂盒 Column DNABACK 常温保存

2 ug pGL3-promoter pGL3-promoter 低温运输,-20℃保存

欧洲药典培养基(EP标准)  

2 ug pFLAG-CMV-2 pFLAG-CMV-2 低温运输,-20℃保存

缓冲蛋白胨水(BPW) Buffer peptone water(BPW) 9ml*20支/包

100mg 蛋白K干粉 Proteinase K Powder 4℃保存

100mL Sodium Cacodylate Buffer(二甲胂酸钠缓冲液),0.1M,pH7.0   Sodium Cacodylate Buffer,0.1M,pH7.0   常温保存

1 管 JM109(DE3)大肠杆菌 JM109(DE3) E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRNA u6.1/neo pRNA u6.1/neo 低温运输,-20℃保存

10次 水样病毒沉淀剂 Water Sample Virus Precipitation Reagent 4℃保存

蔗糖酶测试盒微量法NFKB p52/NFKB2  细胞核因子/k基因结合核因子 p52/p100抗体 规格: 0.2ml

Ets1/ETS-1  Ets转录因子家族ets1抗体 规格: 0.1ml

phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059)  磷酸化管内皮生因子受体2抗体 规格: 0.1ml

Thymulin  胸素抗体 规格: 0.2ml

GOLPH2/GP73  高尔基体膜蛋白GP73抗体 规格: 0.2ml

CIDEC  细胞死亡活化蛋白抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格: 0.1ml

S100A11  S100钙结合蛋白A11抗体 规格: 0.1ml

LRCH2  富含亮重复家庭蛋白2抗体 规格: 0.2ml

ALG11  连接糖基化11抗体 规格: 0.2ml

Met Enkephalin  甲硫脑啡肽抗体 规格: 0.2ml

C1orf51  1号染色体开放阅读框51抗体 规格: 0.2ml

 


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