BL21DE3感受态细胞

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠原成骨细胞)薯蓣皂甙质量规格：BR，含量≥95.0%Dioscin

CL-0288MA-891(小鼠癌高转移细胞)5×106cells/瓶×2薯蓣皂素(标准品)质量规格：HPLC>98.0%,标准品Diosgenin

CLEC4F Others Rat 大鼠 CLEC4F / CLECSF13 人细胞裂解液 (阳性对照) 薯蓣皂素质量规格：>95%,BRDiosgenin

人前脂肪细胞-内脏cDNAHPA-v cDNAD-半胱氨酸盐酸盐一水质量规格：度大于98%,BR，一水物D-Cysteine  monohydrate

BCaP-37细胞，人癌细胞 猴肾细胞系,MA-104细胞 肠静脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)钙蛋白酶抑制剂II(进口)质量规格：≥95%,美国进口Calpain Inhibitor II(ALLM)
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K14-戊氧基苯(>98.0%(GC))4-Amyloxybenzaldehyde质量规格：>98.0%(GC)

LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-丁氧基苯(>98.0%(GC))4-Butoxybenzaldehyde质量规格：>98.0%(GC)

猴源细胞4,4'-二羟基二苯(>98.0%(GC))4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether质量规格：>98.0%(GC)

CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2'-二羟基二苯(>98.0%(GC))2,2'-Dihydroxydiphenyl Ether质量规格：>98.0%(GC)

视网膜色素上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)4-苯甲酰-4'-二苯硫(>98.0%(GC))4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide质量规格：>98.0%(GC)
人微血管内皮细胞HMMEC1,10-双[(4-乙氧羰基)苯氧基]癸烷质量规格：1,10-Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenoxy]decane

CD1D & B2M Others Human 人 CD1D & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,4-苯二硫醇(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)1,4-Benzenedithiol

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS31,3-双[2-(4-羟苯基)-2-丙基]苯(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)1,3-Bis[2-(4-hydroxyphenyl)-2-propyl]benzene

大鼠癌细胞;SHZ-88 肝癌细胞，BEL-7405细胞 MEF细胞，早代小鼠胚胎成纤维细胞双(氨)降莰烷(含有)(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)Bis(aminomethyl)norbornane (mixture of isomers)

MG-63, 人骨肉瘤细胞 Human1,4-双(3-羟基苯氧基)苯(>96.0%(GC))质量规格：>96.0%(GC)1,4-Bis(3-hydroxyphenoxy)benzene
BL21DE3感受态细胞人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1全反式4-酮基视黄酸all-trans 4-Keto Retinoic Acid质量规格：美国进口

TFPI Others Human 人 TFPI 人细胞裂解液 (阳性对照) 5,8-环氧-13-顺式视黄酸(非对映)5,8-Epoxy-13-cis Retinoic Acid(Mixture of Diastereomers)质量规格：美国进口

肾实质细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)全反式5,8-环氧视黄酸 (非对映)all-trans 5,8-Epoxy Retinoic Acid (Mixture of Diastereomers)质量规格：美国进口

TPM4 Others Human 人 TPM4 / opomyosin 4 人细胞裂解液 (阳性对照) 去羟基比卡鲁胺Deshydroxy Bicalutamide质量规格：美国进口

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1去氟比卡鲁胺Desfluoro Bicalutamide质量规格：美国进口
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。