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实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,8582个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒微量法 | 100管/96样 | 微量法 | BK-01S6665 |
商品介绍:
测定意义: 高密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,运载周围组织中的,再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出,是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子,俗称“血管清道夫",对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。 测定原理 用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白,利用酯酶催化酯水解生成游离和游离脂肪酸,从而把酯转化为FC;进一步利用氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自备的仪器和用品 离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。 |
试剂组成和配制:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约42个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
10mg 5′ - 二鸟 Guanosine 5′-Diphosphate (GDP),Disodium Salt -20℃保存
50T 芥末PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
250mL Carnoy固定液 Carnoy Solution 室温避光保存
2 ug pBlueScriptR BBS4 pBlueScriptR BBS4 低温运输,-20℃保存
100g DNGuSCN(异硫酸胍)
2 ug pFUGW-H1 pFUGW-H1 低温运输,-20℃保存
碘液 2ml*20支
2 ug pTf16 pTf16 低温运输,-20℃保存
MUGal肉汤 MUGal Broth 100g
100U Poly(A)聚合,E.coli Poly(A) Polymerase -20℃保存
250mL Phosphate Buffered RIPA Phosphate Buffered RIPA 常温保存
血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒微量法IL-2 白介素2抗体 规格: 0.2ml
Connexin 43 间隙连接蛋白43抗体 规格: 0.1ml
UBE2C 泛素蛋白连接C抗体 规格: 0.2ml
CCZ1 CCZ1蛋白抗体 规格: 0.2ml
RECQL5 RecQ解旋样蛋白5抗体 规格: 0.2ml
Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半胱蛋白9抗体 规格: 0.1ml
Phospho-YB1(Ser102) 磷酸化DNA结合蛋白B抗体 规格: 0.1mlAIM1L 黑色素瘤缺失样蛋白1抗体 规格: 0.2ml
C19orf24 19号染色体开放阅读框24抗体 规格: 0.2mlPGGT1B/FNTB 蛋白香叶烯基转移1β(FTβ)抗体 规格: 0.2ml
PRL3/PRL-R 磷酸酯3蛋白抗体 规格: 0.2mlCD36L1/SRB1/HDL-R 高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体 规格: 0.1ml
ChRM3/Acetylcholine receptor(M3) 毒蕈碱型乙酰受体M3抗体 规格: 0.1mlphospho C-Myc(Thr58/pSer62) 磷酸化致基因C-Myc抗体 规格: 0.1ml
ADAM12/MLTN 去整合素样金属蛋白12抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗鸡IgM 规格: 0.1ml
BGP/Osteocalcin 骨保护蛋白/骨钙素抗体 规格: 0.1mlARC/Arg3.1 ARC抗体 规格: 0.1ml
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