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仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
产品名称 | Paxillin Phospho-Tyr118 Antibody |
检测方法 | 兔多克隆抗体 |
规格 | 50μl |
货号 | BK-S64550 |
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
实验通用规则:
WI-38AV13细胞,人SV-40转化肺成纤维细胞 大鼠胸主动脉平滑肌细胞,VSMC细胞 CL-0010786-O(人肾透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2硫普罗宁(标准品)质量规格:含量测定Tiopronin
SP2/0(小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2多索茶碱质量规格:>99%,BRDoxofylline
HDBEC-c 人类皮肤血内皮细胞(HDBEC)来自少年者 500,000cells 肝动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)多索茶碱(标准品)质量规格:含量测定Doxofylline
心肌成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl 质量规格:>98%,Syk PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl
CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸钠盐质量规格:美国进口Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate salt
NCI-H661细胞,大细胞肺癌细胞 人鼻咽癌细胞,HONE1细胞 CL-0301M-NFS-60 (小鼠白血病细胞G-CSF依赖性)5×106cells/瓶×2D-胱氨酸D-Cystine质量规格:0.98
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1D-阿拉伯糖醇D(+)-Arabitol质量规格:>98%,BR
PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 米吐尔(>98%,BC)Metol质量规格:>98%,BC
膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)盐酸吡哆醛Pyridoxal 质量规格:>98%,BR
IFNG Others Rat 大鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人细胞裂解液 (阳性对照) 硅油Silicone oil质量规格:BR
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人细胞裂解液 (阳性对照) N-二乙基亚硝,英文名或英文缩写:N-nitnosodietxylamine,级别:BR,98%,规格:5克
人肝脏间充质干细胞HMSC-hp2-羰基钠盐 2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用试剂
TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) L(+)树胶全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0
VERO细胞衍生株;SVP偶氮脒类引发剂V50容量:2~8℃1克
CGM1细胞,EB病毒转化的B细胞 人结直肠腺癌细胞,LS174T细胞 CM-R029大鼠肠平滑肌细胞*培养基100mL1,8-桉树脑Cineole
Paxillin Phospho-Tyr118 AntibodyU-937细胞,瘤细胞 人前列腺癌细胞,DU-145细胞 人间充质干细胞-骨髓总RNAHMSC-bm NA铁标准溶液(1000mg/L,溶剂:5%盐酸) Iron solution质量规格:1000mg/L,溶剂:5%盐酸
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B铁标准溶液(500mg/L,溶剂:1%盐酸) Iron solution质量规格:500mg/L,溶剂:1%盐酸
ESAM Others Human 人 ESAM 人细胞裂解液 (阳性对照) 铁标准溶液(100μg/mL(20°C),基体:5%HCl) Iron Standard质量规格:100μg/mL(20°C),基体:5%HCl
小鼠肝癌瘤株;H22铟标准溶液(1000μg/ml,基体:1.0 mol/L 硝酸)Indium standard质量规格:1000μg/ml,基体:1.0 mol/L 硝酸
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 铟标准溶液(100mg/L(20℃),基体:1%HCl)Indium standard质量规格:100mg/L(20℃),基体:1%HCl
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