p53 Phospho-Thr18 Antibody

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
YAC-1细胞，瘤细胞 人结肠腺癌细胞,HT-29细胞 CM-H021人前列腺平滑肌细胞*培养基100mL甾醇；(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Ergosterol

大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1甾醇(90%)质量规格：>90%,BRErgosterol

GFRA1 Others Mouse 小鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 蔓荆子黄素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Vitexicarpin

雪旺氏细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)芒果苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Mangiferin

ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) 吗替麦考酚酯-d4质量规格：美国进口Mycophenolate Mofetil-d4
PRKD3 Others Human 人 PKC nu / PRKD3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 地塞米1酸钠（标准品）Dexamethasone  Phosphate质量规格：HPLC>98%,标准品

小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH3D-蛋氨酸D-Mine质量规格：>98%,BR

RSC96细胞，大鼠雪旺细胞 人肝癌细胞,9204细胞 CL-0136L6(大鼠成肌细胞)5×106cells/瓶×2索非布韦Sofosbuvir (GS-7977)质量规格：>99%,BR

中国仓鼠肺细胞;R 1610 [R1610]D-鸟氨酸盐酸盐D-Ornithine mono质量规格：>98%,BR

ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人细胞裂解液 (阳性对照) D-苯丙氨酸叔丁酯盐酸盐H-D-Phe-OtBu.HCI质量规格：0.98
ECM1 Others Mouse 小鼠 ECM1 人细胞裂解液 (阳性对照) L-α-基-β-羟基，英文名或英文缩写：L-Threonine，级别：BR，99%，规格：10克

人色素瘤细胞;A875BOC-L-天门冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通用试剂

IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 流醋亚铁铵;马尔氏盐;低铁矾;亚铁铵矾;流醋低铁铵;六水合流醋亚铁铵;流醋亚铁铵;六水合流醋铁铵;六水合流醋铁(Ⅱ)铵 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9

人肝窦内皮细胞*培养基 100mL5′-CTP，4Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸四钠盐溶液5UUSP级，98%

LLC细胞，小鼠肺癌细胞 CHO(中国仓鼠卵巢细胞) 恒河猴肺细胞;RM-L1姆沙伯 P AW DMCSChromosorb P AW-DMCS
p53 Phospho-Thr18 Antibody2. 皮肤细胞系统三糖Melezitose hydrate质量规格：>98%,进分

U251人胶质瘤细胞聚乙二醇20000PEG 20000质量规格：BR

人结直肠腺癌细胞;COLO 205 大鼠肾动脉平滑肌细胞*培养基 100mL2-氨基噻唑(>98%，BR)2-Aminothiazole质量规格：>98%，BR

MLA144 MLA144长臂猿瘤细胞氯化铈七水Cerium (III) chloride, heptahydrate质量规格：>99.9%

CHI3L2 Others Human 人 CHI3L2 / YKL-39 人细胞裂解液 (阳性对照) D-阿拉伯糖醇(标准品)D(+)-Arabitol质量规格：分析标准品
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。