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仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
产品名称 | p53 Phospho-Ser33 Antibody |
检测方法 | 兔多克隆抗体 |
规格 | 50μl |
货号 | BK-S64556 |
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
实验通用规则:
白细胞介素-17超家族非草隆(标准品)质量规格:分析标准品Fenuron
人脑血管周细胞 (HBVP) ( 5×105 ) 人脐静脉平滑肌细胞 MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞丁(B9)(标准品)质量规格:分析标准品Daminozide
CM-R041大鼠肝星形细胞*培养基100mL丽丝胺罗丹明B/酸性红52/磺酰罗丹明B 质量规格:BSSulforhodamine B
IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 丽丝胺罗丹明B/酸性红52/磺酰罗丹明B 质量规格:BS Sulforhodamine B
人脊柱间充质干细胞HVMSC氯化罗丹明110;罗丹明110质量规格:>99%Rhodamine 110 chloride
大鼠肾系膜细胞;RMC 骨肉瘤细胞,U-2 OS细胞 Walker-256细胞,大鼠肝癌细胞(癌细胞接种到肝脏成瘤)D-赖氨酸盐酸盐H-D-Lys-OH·HCl质量规格:>99%,BR
HCT116, 人结直肠癌细胞 HumanD-甘露糖(标准品)D-Mannose质量规格:HPLC≥98%,标准品
MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 人细胞裂解液 (阳性对照) N-辛酰基-N-葡糖胺(MEGA-8)N-Octanoyl-N-methylglucamine质量规格:≥97% ,进分
平衡盐溶液HBSSN-癸酰基-N-葡糖胺(MEGA-10)N-Decanoyl-N-methylglucamine 质量规格:>98%,BR
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside质量规格:>98%,BR
小鼠中脑缝神经细胞(脑脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人结肠癌细胞 HumanLGD-4033 质量规格:>98%,BRLGD4033
兔主动脉平滑肌细胞;SMC5-溴嘧啶质量规格:>98%5-Bromopyrimidine
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 阿螺旋霉素质量规格:HSP90 抑制剂,进分17-DMAG
脐动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)大豆异黄酮质量规格:染料木素17%-20%,异黄酮含量在40-50%Soybean isoflavones
蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36 人肺癌细胞,NCI-H1299细胞 A-431(表皮癌细胞)表戈米辛O(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Epigomisin O
p53 Phospho-Ser33 AntibodyHFL1人胚肺成纤维细胞 HFL1 in human embryo lung fibroblasts F12K培养基+10%FBS锌试剂(≥85%(HPLC))Zincon质量规格:≥85%(HPLC)
SCGB1A1 Protein Mouse 重组小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 标签)1,3-二-5-吡唑酮1,3-Dimethyl-5-pyrazolone质量规格:0.96
人胚肾二倍体细胞;CCC-HEK-1 人气管上皮细胞*培养基 100mL氟啶胺(标准品)Fluazinam质量规格:分析标准品
小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14氟节胺(标准品)Flumetralin质量规格:分析标准品
CD300A Others Human 人 CD300A 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯吡脲(标准品)Forchlorfenuron质量规格:分析标准品
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