相关文章
Related Articles详细介绍
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:γ谷氨酰转肽酶(γGT)测试盒可见分光光度法
产品规格:50管/48样
检测方法:可见分光光度法
产品货号:BK-01S6386
产品分类:
商品介绍:
测定意义: γ-GT是γ-谷氨酰循环中的关键酶,催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基转移到受体。也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解,产生谷盐,在细胞外新陈代谢中起了重要的作用。 测定原理: γ-GT催化谷氨酰对硝基苯胺中γ-谷氨酰基转移给N-甘氨酰甘,生成对硝基苯胺,在405nm有特征光吸收;通过测定405nm光吸收增加速率,来计算γ-GT酶活性。 自备仪器和用品: 低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
50次 分枝杆菌RNAout
2 ug pCMV5-300 pCMV5-300 低温运输,-20℃保存
检定培养基 Test Medium 250g
100mg Poly r(A) Poly r(A) -20℃保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.6 Phosphate Buffer,0.2M, pH7.6 常温保存
5nmol 接头DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I接头) Adaptors -20℃保存
2 ug pMW29 pMW29 低温运输,-20℃保存
knudson C 培养基 knudson C Medium 250g
1瓶 SW480细胞株 SW480 低温运输和保存
WS琼脂 WS Salmonella Agar 250g
25g 乙烯利 Ethrel 4℃保存
γ谷氨酰转肽酶(γGT)测试盒可见分光光度法AKT2 蛋白激B2 规格: 0.1ml
phospho-FRS2(Tyr436) 磷酸化成纤维细胞生因子受体底物2抗体 规格: 0.1ml
Syndecan 2/heparin sulphate protoglycans 1 硫酸肝素糖蛋白1抗体抗体 规格: 0.2ml
NFEM5/IRF4/MUM1 淋巴细胞特异性干扰素调节因子抗体 规格: 0.2mlEpigen 上皮细胞有丝分裂蛋白抗体 规格: 0.2ml
CKMT/Creatine kinase MT 酸性型线粒体肌酸激抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Goat IgG/AP 碱性磷酸(AP)标记的兔抗羊IgG 规格: 0.1ml
Rabbit anti-MG IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.1mlCCDC90A 卷曲螺旋结构域蛋白90A抗体 规格: 0.2ml
KAT3B/Ep300 转录接蛋白EP300抗体 规格: 0.2mlCCDC124 卷曲螺旋结构域蛋白124抗体 规格: 0.2ml
Collagen V Ⅴ型胶原抗体 规格: 0.1mlBCAS2 相关蛋白2抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/Gold 胶体金标记的兔抗羊IgG 规格: 0.5mlADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor alpha 1上素能受体抗体 规格: 0.1ml
Phospho-HSP27 (Ser254) 磷酸化热休克蛋白27抗体 规格: 0.1mlNCE2 泛素结合E2F抗体 规格: 0.2ml
γ-Catenin γ-连环素/连接蛋白γ抗体 规格: 0.2mlIGFR3/CD16 FC段γ受体3/免疫球蛋白G Fc段受体III抗体 规格: 0.1ml
Salmonella enteritidis/SE 肠沙门氏菌抗体 0.2mlTHRA1+2 甲状激素受体α1+α2抗体 规格: 0.2ml
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
产品咨询
联系我们
上海帛科生物技术有限公司 公司地址:上海嘉定区嘉罗公路1661 号73栋 技术支持:扫一扫 更多精彩
微信二维码
网站二维码