咨询热线

13928144929

当前位置:首页   >  产品中心  >  生化检测试剂盒  >  其它系列  >  抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒微量法

抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒微量法

简要描述:抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒微量法公司正在出售的产品:2.5L微需氧产气包 英文名称: 产品规格:0789个/包 350ml厌氧培养袋 英文名称: 产品规格:0789个/包 SB培养基 英文名称:SB Medium 产品规格:250g TB培养基 英文名称:TB Medium 产品规格:250g

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-29
  • 访  问  量:716

详细介绍

商品介绍:

测定意义:

AAO是定位于植物细胞壁的糖蛋白,属蓝铜氧化酶"家族。细胞壁内的抗坏血酸和AAO与细胞壁的代谢和生长有着密切的联系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通过质膜上的细胞色素b还原,该过程中电子的跨膜运输能够促进细胞生长。

测定原理:

AAO可直接氧化AsA,通过测定AsA的氧化量,可计算得AAO活力。

实验中所需仪器及设备:

低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,118519个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6393

11.png 

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约8519个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

布氏肉汤添加剂 Brucella Broth Additive 2ml*5

100mg 素 B 硫酸盐 Polymyxin B Sulfate 4℃保存

Littman琼脂 Littman Agar 250g

20 mg L-Canavanine(iNOS抑制剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL E. Coli Lysis Buffer-II,pH7.4  E. Coli Lysis Buffer-II,pH7.4  常温保存

100mL 去离子甲酰胺 Deionized Formamide 4℃保存

2 ug pINIIIompA pINIIIompA 低温运输,-20℃保存

气单胞菌鉴别琼脂 Aeromonas Differential Agar 250g

1瓶 L6565细胞株 L6565 低温运输和保存

mTSB肉汤 mTSB Broth With Novobiocin 250g

5mg 羧肽 B( 猪胰 ) Carboxypeptidase B  -20℃保存

抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒微量法PSMD10/Proteasome 26S S10  蛋白调解因子10抗体 规格: 0.2ml

TRIM35  TRIM35蛋白抗体 规格: 0.2ml

GRASP65  高尔基体外周膜蛋白p65抗体 规格: 0.2ml

CHKL/Ethanolamine kinase beta  乙醇胺激β抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgM/Cy7  Cy7标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1ml

TCF9/GCF  转录因子9抗体 规格: 0.2ml

TANK  TANK抗体 规格: 0.1ml

XTP4  毒X蛋白反转录蛋白4抗体 规格: 0.2ml

FRMD2/FRMPD1  FRMD2蛋白抗体 规格: 0.2ml

MARCH6  膜相关环指蛋白6抗体 规格: 0.2ml

SOAT1/ACAT1  酰基转移1抗体 规格: 0.2ml

GLUT1  葡萄糖转运蛋白1抗体 规格: 0.1ml

 


产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

联系我们

上海帛科生物技术有限公司 公司地址:上海嘉定区嘉罗公路1661 号4370栋   技术支持:

扫一扫 更多精彩

微信二维码

网站二维码